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微生物菌的发酵工艺流程是什么
时间:2026-05-27浏览量:25


一、菌种制备(起点)

从菌种保藏机构获取或自行筛选目标菌株(如枯草芽孢杆菌产酶、酵母菌产酒精),经斜面活化→液体摇瓶培养→逐级种子扩大(一级种子罐→二级种子罐),获得足够活力与数量的种子液。这一步决定了后续发酵的"基因底色"。

二、培养基配制与灭菌(基础)

按配方混合碳源(葡萄糖/淀粉)、氮源(蛋白胨/玉米浆)、无机盐及生长因子,配成液体培养基。随后进行湿热灭菌(121℃/0.1MPa,15-30min),同时发酵罐空罐灭菌、空气经0.22μm除菌滤芯处理,确保系统无菌。

三、接种(关键节点)

在超净工作台或无菌接口下,将种子液按3%-10%接种量转入已灭菌的发酵罐。此步一旦染菌,整罐报废,是污染防控的*高风险点。

四、发酵培养(核心战场)

微生物在罐内经历迟滞期→对数生长期→稳定期→衰亡期四个阶段,需精准控制:

  • 温度:中温菌20-40℃(如37℃),PID控制精度±0.1-0.2℃;

  • pH:通过流加酸碱维持5.0-8.0*适范围;

  • 溶氧DO:好氧菌需通气+搅拌维持DO>30%,厌氧菌则严格隔氧;

  • 补料策略:采用流加发酵(Fed-batch),按需补糖/氮源,避免底物抑制,延长产物合成期。


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