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15837131220微生物培养基配制与灭菌的步骤
时间:2026-05-27浏览量:34
培养基的配制与灭菌是发酵工艺流程中决定成败的**道关卡——配料不准导致代谢异常，灭菌不彻底导致整罐染菌报废。以下按工业级SOP标准，分配制→调配→灭菌→冷却→移送五大阶段逐一详述。
**阶段：原料准备与称量
1. 原料清单（以典型细菌发酵培养基为例）
| 原料类别 | 典型品种 | 用量（每1000L） | 作用 |
|---|---|---|---|
| 碳源 | 葡萄糖、淀粉水解糖、糖蜜 | 80-120 kg | 提供能量与碳骨架 |
| 氮源 | 豆饼粉、玉米浆、硫酸铵、蛋白胨 | 15-30 kg | 合成蛋白质与核酸 |
| 无机盐 | KH?PO?、MgSO?·7H?O、CaCO?、NaCl、FeSO?·7H?O、MnSO? | 3-8 kg | 酶辅因子、渗透压调节 |
| 生长因子 | 维生素B?、生物素（视菌株需求） | 微量（mg级） | 代谢必需辅酶前体 |
| 消泡剂 | 豆油、聚醚类（PPG） | 0.02%-0.05% | 抑制泡沫 |
| 水 | 去离子水/纯化水 | 补至1000L | 溶剂 |
2. 称量操作规范
所有固体原料在称量室用电子天平（精度0.01g）称量，记录批号与重量。
葡萄糖需单独称量（易吸潮），CaCO?*后加入（防止与磷酸盐反应生成沉淀）。
玉米浆等液体原料用流量计定量，记录密度校正值。
全程佩戴无粉手套、口罩，防止交叉污染。
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